炎性因子分析（一恒水槽应用）

1 材料

实时 荧 光 定 量 PCＲ 系 统 ( 型 号 为 7500 ＲeaL Time PCＲ System)，购自美国 AppLied Biosystems 公 司;紫外分光光度仪(型号为 UV－20)，购自 Hoefer 公 司;电泳仪(型号为 DYY－6C)，购自北京六一生物科 技有限公司;电热恒温水槽(型号为 DK－8D)，购自上海一恒科技有限公司。

2 方法

120 只 1 日龄伊莎公鸡饲喂 15 d 后随机分为 12 组，其中急性冷应激处理 6 个组，慢性冷应激处理 6 组，10 只/组。在急性冷应激处理中，其中 5 个组伊 莎公鸡处于(12 ±1)℃ 的寒冷环境中并分别保持 1， 3，6，12，24 h，作为试验组;另一组伊莎公鸡保持在 25 ℃环境中，作为对照组(0 h 组)。在慢性冷应激 处理中，其中 3 个组伊莎公鸡处于(12±1)℃ 的寒冷 环境中并分别保持 5，10，20 d，作为试验组;并分别设 立 3 个对照组，25 ℃保持 5，10，20 d。试验期间伊莎 公鸡可以自由获取食物和水。在各时间点剖杀伊莎 公鸡后立即取 0. 5 g 肝脏组织保存于液氮中，用于后 续实时荧光定量 PCＲ 扩增、Western－blot 检测。

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