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痤疮致病菌分析(一恒生化培养箱使用)

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-05-12 16:00【

1 主要试剂与仪器 


痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,P. ac- nes,BNCC 336649) 购自北纳创联生物技术有限公 司;金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. au- reus,ATCC 25923) 购自广东省微生物菌种保藏中 心;黄芩片(批号 190102)购自河北安国市誉林药业 有限公司;葡萄糖酸锌(纯度 99% 批号 20170412) 购自河南雅辉化工产品有限公司;硫酸庆大霉素注 射液(批号 20170710)购自天津金耀药业有限公司; 头孢氨苄(批号 170301)购自天津市中央药业有限公司;LB 肉汤购自北京索莱宝科技有限公司;改良 GAM 培养基、营养琼脂培养基均购自山东拓普生物 工程有限公司;厌氧产气袋、厌氧培养袋(日本三菱 瓦斯化学株式会社);HCB-900V 垂直层流洁净工作 台(青岛海尔特种电器有限公司);生化培养箱(上海一恒科学仪器有限公司);ZWY-240 恒温培养振 荡器(上海智诚分析仪器制造有限公司);LS-B50L 立式压力蒸汽灭菌器(上海医用核子仪器厂);infi- nite200 全波长酶标仪(美国帝肯 TECAN 公司)。


2 方法


分别配制硫乙醇酸盐培养基、改 良 GAM 培养基、LB 肉汤和营养琼脂培养基,将配 制好的培养基置锥形瓶中密封,放入灭菌锅中于 121 ℃下灭菌 30 min,待冷却后,置于 4 ℃冰箱中保 存备用。取 100 μL 金黄色葡萄球菌甘油 冻存液于 10 mL LB 肉汤中,在 37 ℃、150 r/min 的条 件下置于恒温振荡器中培养 16 h 进行活化,随后采 用平板计数法进行菌落计数,使用前用 LB 肉汤稀 释;取 100 μL 痤疮丙酸杆菌甘油冻存液于 5 mL 硫 乙醇酸盐培养基中,在 37 ℃条件下厌氧培养 48 h 进行活化,随后采用平板计数法进行菌落计数,使 用前用改良 GAM 肉汤稀释。


3 结果


黄芩与葡萄糖酸锌联用后对金黄色葡萄球菌 的抑菌活性与黄芩单用相比显著增强(P<0.01),而 与葡萄糖酸锌单用相比无明显差异(P>0.05);联合 用药对痤疮丙酸杆菌的抑菌活性与两药单独使用 相比均显著增强(P<0.01)。生长率>20% 标记为黑色,生长率≤20%标记为灰色,结果显示在 1/8 MIC 黄芩-1/8 MIC 葡萄糖酸锌、1/4 MIC 黄芩1/8 MIC 葡萄糖酸锌、1/8 MIC 黄芩-1/4 MIC 葡萄糖 酸锌、1/4 MIC 黄芩-1/4 MIC 葡萄糖酸锌作用下,联 合用药开始表现明显的抑菌作用。





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