一恒DZF-6020对马齿苋中总黄酮提取工艺的使用

马齿苋( Portulaca oleracea L) 为马齿苋科植物 马齿苋的全草，是一年生的肉质草本植物，在我国有 着悠久的应用历史，其营养价值和药用价值都很高， 是我国卫生部规定的 78 种药食同源野生植物之一。 马齿苋性寒，酸，入心、肝、脾、大肠经，具有清热解 毒、凉血止血、止痢健胃等功效。

1 仪器与试剂 

UV2550 型紫外-可见分光光度计( 日本岛津) ;FA1204B 型电子分析天平( 上海佑科仪器仪表有限 公司) ; ＲE-52A 型旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器 厂) ; SHB-B95A 型循环水式多用真空泵( 郑州长城 科工贸有限公司) ; DZF-6020 型真空干燥箱( 上海一恒科学仪器有限公司) ; FW135 型中草药粉碎机( 天 津市泰斯特仪器有限公司)

2 方法与结果

精密称量芦丁标准品 10 mg，得浓度为 0. 2 mg·ml-1 的对照品储备液，备用。称取干燥后的马齿 苋样品粗粉 10. 00 g，石油醚回流脱脂后按单因素实 验和效应曲面设计法试验中不同的提取条件回流提 取，将提取液冷却浓缩，用 60% 乙醇溶解定容至 50 ml 容量瓶中，作为样品待测液。精密量取对照品溶液 0. 5 ml、1. 0 ml、2. 0 ml、3. 0 ml、4. 0 ml、5. 0 ml，分别 用 60% 乙醇溶液定容至 10 ml 的容量瓶中，各加入 1 ml 5% NaNO2 溶 液，振 摇，放 置 6 min，加 入 1 ml10% AL( NO3 ) 3 溶液，振摇，再放置 6 min，然后各 加入 4% NaOH 溶液 1 ml，用 60% 乙醇定容，振摇， 静置 15 min，在波长 510 nm 处测定。以芦丁浓度为 横坐标( X) ，吸光度为纵坐标( Y) ，做标准曲线，得 方程 Y = 16. 105X － 0. 0046( Ｒ2 = 0. 9998) 。取马齿苋粗粉 5 份，每份 10. 0 g，分别加入 10 倍量 体积乙醇浓度 50% 、60% 、70% 、80% 和 90% 的溶液 回流提取 1 h，按“2. 2. 1”项下操作，于 510 nm 处测 定，计算出总黄酮的含量，结果见图 1。随着乙醇体 积浓度的增加马齿苋总黄酮的提取率随之升高，当 乙醇浓度为 80% 时，总黄酮的提取率最高，随后总 黄酮提取率开始下降。因此，提取时选择浓度为 70% ～ 90% 乙醇。

3 讨 论 

通过单因素分别考察了料液比、提取温 度、提取时间和乙醇浓度对马齿苋总黄酮提取率的 影响，确定了影响提取率的主要因素。由于 Box-Behnken 效应面法是采用非线性数学模型拟合，并在 中心点进行重复性试验，可以提高试验的精确度，能 够更好的体现各因素与效应值的关系，故本实验 采用 Box-Behnken 效应面法设计试验，建立了回归 模型，并通过方差分析，得出各个因素之间的交互作 用都很强，确定影响马齿苋总黄酮提取率的因素主 次关系依次为提取温度 ＞ 乙醇浓度 ＞ 料液比。此模 型能较好地预测马齿苋提取的总黄酮得率，对将 Box-Behnken 效应面法用于马齿苋中总黄酮提取工 艺的产业化具有一定的指导意义。

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