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化瘀骨合片提取工艺优化-一恒DZF-6050使用

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-12-31 09:43【

股骨头坏死是骨科领域常见的难治性疾病,有 “轻则 残疾,重则瘫痪”的说法,近年来随着人们生活方式的 改变、交通事故的增加、激素的滥用,其发病率逐年上升, 严重影响 患 者 生 活。中医将股骨头坏死归属为 “骨 蚀” “骨疹”“骨痹”的范畴,大多采用补肾、健骨、活血、行 气、疏经等方法进行治疗。


1 材料 


1. 1 仪器 


JJ500 型电子天平 ( 常熟市双杰测试仪器厂) ; JP-300A 型高速多功能粉碎机 ( 永康市久品工贸有限公 司) ; DC-NSG-30 型多功能提取罐 ( 上海达程实验设备有 限公司) ; 旋转蒸发仪 ( 德国 Heidolph 公司) ; DZF-6050 型 真空干燥箱 ( 上海一恒科技有限公司) ; JJ3000 型动物电 子秤 ( 香港 G&G 有限公司) ; BS224S 型电子天平 ( 万分之 一,德国 Sartorius 公司) ; 3K30 型离心机 ( 美国 Sigma 公司) ; 全自动血液流变仪 ( 北京普利生仪器有限公司) 。

1. 2 试药

必理通 ( 中美天津史克制药有限公司,国药准 字 H12021118,0. 5 g /片) ; 通络生骨胶囊 ( 浙江海正药业 股份有限公司,国药准字 Z20040001) ; 盐酸肾上腺素注射 液 ( 广州白云山明兴制药有限公司,批号 101001) 。内毒 素 ( LPS) ( 美国 Sigma 公司,批号 L2880) ; 甲强龙 ( MP) ( 比 利 时 辉 瑞 公 司,批 号 M96447 ) ; 注 射 用 青 霉 素 钠 ( 80 万单位,西南药业股份有限公司,批号 170309) 。

1. 3 动物

SPF 级 NIH 小鼠,雌雄各半,体质量 18~ 22 g, 由广 东 省 医 学 实 验 动 物 中 心 提 供, 合 格 证 号 44007200027585; SPF 级 SD 大鼠,雌雄各半,体质量180~ 220 g,由广东省医学实验动物中 心提供,合 格 证 号 4400720029427 ( 血瘀模型) 、44007200035572 ( 激素性股 骨头 坏 死 模 型) 。实验动物生产 许可证号 SCXK ( 粤) 2013-0002,饲养于广东省中医药工程技术研究院 SPF 级动 物实验室,设施使用许可证号 SYXK ( 粤) 2015-0059。

2 方法

2. 1 制备方法

2. 1. 1 样品一

按处方比例称取 6 036 g 饮片,取 152 g 白 芍粉碎成细粉,柳豆叶加水煎煮 2 次,第 1 次加 12 倍量水 提取 1. 5 h,第 2 次加 12 倍量水提取 1 h,合并 2 次煎液, 滤过,滤液浓缩成稠膏 1; 取川芎、当归一起加 6 倍量水 浸泡 1 h 后提取 6 h,收集挥发油,药渣与剩余白芍及其余 饮片加水煎煮 2 次,第 1 次加 12 倍量水提取 1. 5 h,第 2次加 10 倍量水提取 1 h,合并 2 次煎液,滤过,滤液浓缩 成 1 g 稠膏相当于 1~ 1. 5 g 饮片的清膏,加入乙醇充分搅拌 以使含醇量达 65%,静置 24 h,滤过,滤液回收乙醇,浓 缩成稠膏 2。合并稠膏 1、2,加入白芍细粉混匀,干燥, 粉碎,再加入挥发油混匀,制成 1 g 干浸膏含 5. 08 g 饮片。


2. 1. 2 样品二

按处方比例称取 6 036 g 饮片,川芎、当 归一起加 6 倍量水浸泡 1 h 后提取 6 h,收集挥发油,药 渣、熟地黄加水煎煮 2 次,第 1 次加 12 倍量水提取 1. 5 h, 第 2 次加 10 倍量水提取 1 h,合并 2 次煎液,滤过,滤液 浓缩成稠膏 1; 柳豆叶、白芍等其余饮片加水煎煮 2 次, 第 1 次加 15 倍量水提取 1. 5 h,第 2 次加 10 倍量水提取 1 h,合并 2 次煎液,滤过,滤液浓缩成 1 g 稠膏相当于 1~ 1. 5 g 饮片的清膏,加入乙醇充分搅拌以使含醇量达 65%, 静置24 h,滤过,滤液回收乙醇,浓缩成稠膏 2。合并稠膏 1、2,混匀,干燥,粉碎,再加入挥发油混匀,制成 1 g 干浸膏含 4. 17 g 饮片。


3 结果


正常组大鼠股骨头组织外膜完整,骨小梁 紧密排列,没有出现断裂损伤,其小梁上无空骨陷窝; 模型组大鼠股骨头组织外膜出现破裂,不完整,骨小梁破坏 程度大,呈现断裂不规则现象,其上方有明显空骨陷窝。


4 讨论

化瘀骨合方原为临床汤剂,前期将其制成胶囊剂,但 由于提取物引湿性较强,内容物易出现结块; 片剂具有剂 量准确,质量稳定,服用、携带、储存方便,机械化生产, 产量大,成本低等优点,故本实验拟将其开发成该剂型。 研究表明,柳豆叶中黄酮类成分具有加快成骨转化作 用,木豆素具有镇痛、抗炎、抗渗出等作用; 白芍中芍 药苷具有改善血液流变学、抑制血小板凝集等作用; 川 芎、当归挥发油具有抗炎镇痛作用,阿魏酸、川芎嗪具有 抑制血小板聚集、改善骨髓微环境等作用; 熟地黄中 毛蕊花糖苷能明显抑制破骨细胞的分化和形成,多糖可增 强人体的造血、免疫功能,由此可知,与化瘀骨合方 功能主治及药理作用相关的有效物质主要为挥发性成分及 芪类、黄酮类、苷类、多糖类、有机酸类等水溶性成分。 本实验在原胶囊剂工艺 ( 工艺一) 的基础上根据上述成分 性质,采用水作为提取溶剂,同时为了保证制剂成型,研 究挥发油、多糖对本方功效作用的贡献程度,又设计了分 别保留挥发油或多糖的提取工艺,通过药效实验进行优化, 其中工艺二保留挥发油、多糖成分,工艺三保留多糖而不 保留挥发油,工艺四保留挥发油而不保留多糖。




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