分享鳞状细胞癌细胞的增殖的过程

口腔鳞状细胞癌，简称口腔癌，是口腔颌面部 最常见的恶性肿瘤之一，预后较差，五年生存率仅为 40%～50%。多年来，对于口腔癌采用的治疗方法是手术 联合放、化疗的综合治疗，现临床上常用的化疗药物：5-氟 尿嘧啶、顺铂、紫杉醇及长春新碱等多有毒副作用大，易 产生耐药性等不良反应，因此，亟待寻找到一种应用剂量 少，不良反应小且靶向性强的化疗药物。

1 材料和方法

1.1 细胞培养

SCC-9细胞系购于南京科佰生物科技有限公司。使用 10%胎牛血清、DMEM/F12培养液、1%青链霉素混合液配 制成的完全培养基培养SCC-9细胞系，将细胞系置于37℃、 5%CO2的恒温培养箱(上海一恒LHS-100CH恒温恒湿培养箱)中培养。 

1.2 细胞增殖实验

将处于对数生长期的SCC-9细胞，按照1.0×104个细胞 ／孔的密度接种于96孔板，每孔100 μL，每组设3个复孔。 24 h后去除培养基，以不加药的完全培养基组作为对照组， 分别以完全培养基和苦参碱配制0.125、0.25、0.5和1.0 g/L 的苦参碱溶液作为药物组作用于SCC-9细胞，每孔100 μL。 12、24 h后向每孔中加入10μL CCK-8试剂，于37℃细胞培养 箱中孵育4 h，在酶标仪450nm处测量各孔OD值。

1.3 统计学方法

采用GraPhPad Priam7.0统计软件进行数据分析，实验数 值采用均数±标准差（mean±SD）表示，组间差异比较采 用方差分析和t检验，以P＜0.05为差 异有统计学意义。

2  结  果

苦参碱抑制口腔癌细胞SCC-9的增殖：CCK-8法检测不 同浓度的苦参碱作用于SCC-9细胞后，在不同时间的细胞 增殖抑制作用。图1所示，苦参碱可以抑制SCC-9细胞的增 殖，且呈浓度和时间依赖作用。除12 h的0.125 g/L的苦参碱 作用于细胞后与对照组相比无统计学意义，其余各浓度组 在12、24 h后与对照组相比，差异均有统计学意义。 我们将OD值换算成细胞抑制率，图2所示，各实验组的 细胞抑制率随着苦参碱浓度的升高而增加，呈剂量依赖关系。

3  讨  论

苦参碱是从苦参干燥根茎中提取的活性成分，除具有 抗炎、抗病毒、抗纤维化和调节免疫力等作用外，近年 研究证实苦参碱对多种肿瘤细胞有明显的抑制作用，它能 有效抑制肿瘤细胞增殖以及促进肿瘤细胞凋亡。 本研究采用CCK-8法观察苦参碱对口腔癌SCC-9细胞 的体外增殖的影响。结果显示苦参碱对口腔癌SCC-9细胞增殖有显著的抑制作用，并具有时间－浓度依赖性。Yu， H.B向肝癌细胞的培养中加入苦参碱，采用MTT法发现， 肝癌细胞的增殖受到抑制。苦参碱对胰腺癌、膀胱癌细胞 增殖也有抑制作用。且随着药物浓度增加，细胞增殖抑制 率逐渐增高，呈剂量依赖性。虽然我们已经证实苦参碱能 够抑制口腔癌细胞的增殖，但是其中的机制还有待进一步研究。