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纳豆固态发酵分析(上海一恒LRH-250使用)

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-03-26 14:27【

1 材料与设备


1.1 材料


高精密电子天 平 梅 特 勒-托 利 多 仪 器(上 海)有 限公司;手提式压力蒸汽灭菌器 浙江新丰医疗器械 有限公司;上海一恒LRH-250生化培养箱 上海一恒科技有限公司;洁净工作台 上海博迅实业有限公司医疗设备 厂;紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责 任公司;移液枪 大龙兴创实验仪器(北京)有限公司; 高转速离心机 北京京立离心机有限公司;精密恒温 水浴槽 杭州雪中炭恒温技术有限公司。黑豆:购自山东省青岛市四方利群集团股份有限 公司;纳豆芽孢杆菌(BN-3-1):筛选自日本滨梨纳豆。


2 试验方法


用比浊法测定纳豆菌生长曲线,取实验 室保藏的菌种进行活化,每隔3h利用分光 光 度 计 测 定二次 活 化 后 的 纳 豆 菌 液 的 光 密 度,测 到 第36h 为 止,利用光密度值可知菌液浓度。将测得的光密度 值(OD660)与所对应的时间作图,可绘出纳豆菌的生长 曲线,取对数生长期的菌液进行接种。精选黑豆→清洗→浸泡→蒸煮→接种→适当条件 下发酵→冰箱中后熟→纳豆成品。称取20g优质 黑 豆,用 清 水 清 洗 两 三 遍,除 去 黑 豆表面杂质,加 入60mL 去 离 子 水,浸 泡 黑 豆。将 浸 泡好的黑豆沥干水分,放进121 ℃高压蒸汽灭菌锅内 蒸煮一定时间。煮熟的黑豆先进行冷却,冷却到70℃ 左右接种一定量的纳豆菌,搅拌均匀以保证豆子表面均匀沾满菌液。接种纳豆菌后的黑豆放入设定温度的 恒温培养箱发酵一定时间。将发酵好的黑豆进行冷 藏,后熟7~8h,即可得到成熟的纳豆。


3 结果与分析


观察纳豆芽孢杆菌BN-3-1的生长曲线,发现其基 本符合微生物生长周期的4个阶段,应接种15h的纳 豆菌,此时 的 纳 豆 菌 正 处 于 对 数 生 长 期。0~6h 为 BN-3-1的调整期,6~15h为 BN-3-1的对数生长期, 15~24h为 稳 定 期,并 从24h开 始 转 为 衰 亡 期。因 此,选取对数生长期的15h作 为 BN-3-1的 最 适 发 酵 种龄。






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