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上海一恒解析黑豆纳豆保护剂的选择!

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-08-12 14:11【
细胞和组织在冻干过程中会受到不同程度的损伤,包括机械损伤、细胞膜损伤以及细胞代谢调节功能的损伤,更严重的会导致细胞或组织死亡。上海一恒科学仪器有限公司了解到众多研究发现,加入冻干保护剂可以降低冻干过程对细胞组织的损伤程度,尽可能保持其原有的组织结构和生物活性。冻干保护剂能将细胞和菌体最大面积地包裹在其中,减少细胞组织和菌体与氧气间接或直接接触,为细胞提供一个良好的休眠环境,因此能够达到延长物料的储存期,使物料在一定时间内保持较高活性的效果。在添加壳聚糖的条件下,本文上海一恒科学仪器有限公司首先考察8种冻干保护剂对纳豆激酶在冻干过程中的保护效果,然后做正交试验,以纳豆激酶酶活和纳豆菌存活率为指标,最终确定最佳的复合冻干保护剂组合,以期为纳豆激酶冻干保护剂的进一步开发和应用提供理论依据。

1.仪器与设备
NH-4型数显恒温磁力搅拌水浴锅,常州赛普实验仪器厂;ARRW60型电子精密天平(精密度为0.01g),奥豪斯(上海)公司;可调移液器,大龙兴创实验仪器(北京)有限公司;数字酸度计,上海大普仪器有限公司;DHP-9012型电热恒温培养箱,上海一恒科学仪器有限公司;电子数显卡尺,无锡凯保鼎工具有限公司;LGJ-1冷冻干燥机,上海医用离心机厂;SHA-13恒温振荡器,常州国华电器有限公司;XH-C旋涡混合器,常州恩培仪器制造有限公司。


上海一恒DHP-9012台式电热细菌培养箱
2.正交试验优化纳豆激酶冻干保护剂
选取脱脂乳粉、蔗糖、麦芽糊精和抗坏血酸4种冻干保护剂进行4因素3水平的正交试验,共9组试验,每组做3次平行试验,进一步优化其冻干参数。试验设计及结果见表1。

                                                                     表1 正交试验设计及结果

由表1可以看出,对于纳豆激酶的酶活保持率,各因素对试验的影响显著性顺序为A(脱脂乳粉)>D(抗坏血酸)>C(麦芽糊精)>B(蔗糖),最佳方案为A3B2C2D3;而对于纳豆激酶的纳豆菌存活率,各因素对试验的影响显著性顺序为A(脱脂乳粉)>D(抗坏血酸)>B(蔗糖)>C(麦芽糊精),最佳方案为A3B1C3D3。这两个最优方案并不完全相同,脱脂乳粉和抗坏血酸的添加量对于酶活保持率和纳豆菌存活率都是最重要的影响因素,两者先后顺序也一致,且均选择第3水平为试验的最佳水平。蔗糖和麦芽糊精对试验的影响是次要因素。上海一恒科学仪器有限公司结合实际需求,选取A3B1C2D3作为最佳冻干保护剂组合,即:脱脂乳粉添加量16%,抗坏血酸添加量1.2%,麦芽糊精添加量8%,蔗糖添加量8%。通过验证,在此条件下冻干的纳豆激酶酶活保持率为79.8%,纳豆菌存活率为83.2%,较单一保护剂有较大提升,这是因为各种保护剂间存在协同作用,使冻干效果显著提高。

3结论
从8种冻干保护剂中选出对纳豆激酶和纳豆菌保护效果较好的,做正交试验。上海一恒科学仪器有限公司通过极差分析并结合实际,确定最佳的冻干保护剂组合,即:脱脂乳粉添加量16%,抗坏血酸添加量1.2%,麦芽糊精添加量为8%,蔗糖添加量8%。通过验证,在此条件下冻干的纳豆激酶酶活保持率为79.8%,纳豆菌存活率为83.2%,较单一保护剂有较大提升,冻干效果显著提高。
以上内容仅供参考。